酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值。
檢測單位:
光通過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長,在此波長下,此物質(zhì)能夠吸收zui多的光能量。如果選擇其它的波長段,就會(huì)造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此,在測定檢測物時(shí),我們選擇特定的波長進(jìn)行檢測,稱為測量波長。
但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,我們再選取一個(gè)參照波長,以消除這個(gè)不準(zhǔn)確性。在參照波長下,檢測物光的吸收zui小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。
酶標(biāo)儀的中心定位
儀器會(huì)自動(dòng)對酶標(biāo)孔進(jìn)行中心定位,中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準(zhǔn)確。在對每一個(gè)酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測時(shí),儀器其實(shí)要進(jìn)行35個(gè)點(diǎn)的測量,選取zui中間的5個(gè)點(diǎn)的均值為本孔的OD值。
光源的參照通道
參照通道是用來校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響。