隨著
多功能酶標(biāo)儀在國內(nèi)各高校實驗室逐漸推廣開來,多功能酶標(biāo)儀品牌和型號也逐漸多了起來,亂花漸欲迷人眼。各品牌都有各自的一個甚至多個系列產(chǎn)品線,特性各不相同,選購時各種技術(shù)參數(shù)、技術(shù)指標(biāo)令人眼花繚亂,本文嘗試從用戶實際使用的角度,探討應(yīng)該如何看待花樣繁多的參數(shù)特性,希望能幫助大家找到真正合適自己的多功能酶標(biāo)儀。
光柵型濾光系統(tǒng)儼然已經(jīng)成為了目前通用性多功能酶標(biāo)儀的主流,多家廠家共同努力,已經(jīng)把光柵技術(shù)推到了歷史新高。在光柵的眾多技術(shù)參數(shù)之中,zui關(guān)鍵的無疑就是光柵的雜光率和波長選擇的正確性了。
雜光率指得就是光源通過光柵后,得到的光線中,“不需要”的波長的光占所標(biāo)稱波長的光的比例,表征了濾光的純度。由于光線干涉、衍射等的復(fù)雜性,無論使用濾光片還是光柵,雜光都是不可避免的。各種濾光技術(shù)的本質(zhì)就是要想辦法把雜光盡可能地往掉。一般來說,濾光片型的雜光率在10-4——10-5之間,光柵型的可以做到10-6——10-7。由于此類雜光是非特異的,而且會直接進進zui后的檢測器,所以有多少的雜光就會引進多少的隨機誤差。在熒光等檢測過程中,由于檢測器存在放大效應(yīng),雜光率的干擾也會被指數(shù)級放大。因此,雜光率就是一個濾光系統(tǒng)的首要性能指標(biāo)。
光柵的另一個重要指標(biāo)就是波長選擇的正確性。由于很多檢測是依靠于物質(zhì)在某個波長的特征圖譜。就像DNA/RNA的OD260濃度測定,實際檢測波長偏離260nm幾個nm以上的話,OD值與*濃度之間的數(shù)學(xué)關(guān)系就會發(fā)生改變。因此,一組性能優(yōu)良的光柵系統(tǒng),他的波長選擇正確性應(yīng)該是在±0.5——1nm之間。波長偏離過大有時就會影響到*結(jié)果的正確性。
這兩個可謂是光柵甚至濾光片濾光系統(tǒng)zui關(guān)鍵的技術(shù)參數(shù),直接影響到的是得到數(shù)據(jù)是否是真正所要丈量的結(jié)果,是實驗結(jié)果可靠性的zui基本要求。
多功能酶標(biāo)儀的分類方法眾多,但zui簡單的莫過于用他們的濾光方式來作分界線。一般來說,可以分為濾光片型和光柵型兩大類。一臺機器里面同時裝上了濾光片和光柵。但是濾片和光柵并不能同時完成同一個檢測,還是想用光柵的時候用光柵,該用濾片的時候用濾片;還有一些實驗非用其中一個不可,另一模塊實現(xiàn)不了的。所以這類儀器本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起,并沒有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。
總體來說,濾片技術(shù)由于發(fā)展已久,配合二向色鏡(實在也就是另一模式的濾光反光濾鏡)等光路系統(tǒng),可以實現(xiàn)大部分實驗的需要。目前常規(guī)多功能酶標(biāo)儀中zui高的檢測靈敏度就是用濾光片型做出來的,比較適合常規(guī)實驗。